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保存温度：RT储存，未开封可保存24个月。
注：KD2099原货号为SK2410。
产品说明：
本试剂盒用于酵母质粒的小量提取实验，提取过程无需酶解，无需使用酚、氯仿等有毒有害试剂。本试剂盒使用传统沉淀法纯化，耗时稍长(整个提取过程约需3h)，但可获得较高的产率。对于大片段质粒(＞10 Kb)，与市场常规吸附柱纯化方法相比，损耗率较低。由于酵母质粒拷贝数极低，提取所得质粒，无法通过分光光度计或电泳检测。适用于PCR检测或者转化大肠杆菌的实验。
准备工作：
预先在C液中加入注明量的无水乙醇，颠倒混匀后置于-20℃或冰上待用；在D液中加入注明量的无水乙醇待用。
操作步骤：
裂解酵母
1.用离心管收集1.5mL过夜培养好的酵母菌液，12000rpm离心30sec，弃上清；
2.用100μL A液悬浮酵母菌体，加入0.2g玻璃珠；涡旋震荡5min，然后再加入100μL A液，继续涡旋震荡1～2min；
3.在100℃水浴或金属浴上保温3～5min后迅速置于冰上冷却；
4.12000rpm于4℃离心10min。
质粒纯化
1.吸取100μL的上清液至新离心管中，加入50μL B液，-20℃放置1h；
2.12000rpm于4℃离心10min，吸取上清液100μL到新的离心管中；
3.上述上清液中加入2倍体积的预冷C液(确定已经加入无水乙醇)，迅速颠倒混匀，置于冰上15min，12000rpm于4℃离心10min。
4.小心吸弃上清，避免触及沉淀；在沉淀中加入1mL的D液(确定已经加入无水乙醇)，以12000rpm于4℃离心3min；
5.吸弃上清液，沉淀在室温干燥后，加入20～50μL的ddH20溶解沉淀；
6.所得产物可用于PCR，转化大肠杆菌等后续实验。
注意事项：
1.C液和D液加入乙醇易挥发，用后及时拧紧盖子。
2.通常酵母质粒拷贝数较低，通过琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计很难检测到。
3.通过此方法提取的酵母质粒1～5μL可用做PCR反应的模板或者用于转化大肠杆菌。
相关搜索：酵母质粒小提试剂盒，Yeast Plasmid Preps Kit